Relación entre el virus del papiloma humano y la amplificación del gen de la ciclina D1 en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello / The relationship between human papillomavirus and cyclin D1 gene amplification in squamous cell carcinomas of the head and neck

Introducción: La infección por los subtipos oncogénicos del virus del papiloma humano (HPV) y la amplificación del gen de la ciclina D1 (CCND1) son dos alteraciones frecuentes en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello. El objetivo de este trabajo es estudiar la relación entre la presencia del HPV y el desarrollo de la amplificación delCCND1 en dichos carcinomas. Material y métodos: Se estudian 59 carcinomas epidermoides de cabeza y cuello, en los cuales se determina la presencia de los tipos 6b y 16 del HPV y la amplificación del CCND1 mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Resultados: Se detectó el ADN del HPV en 14 tumores (24%). Diez de ellos eran positivos para el HPV 6b y 4 para el HPV 16. El gen CCND1 se hallaba amplificado en 15 casos (25%). Aunque la amplificación del CCND1 fue más frecuente en los casos con integración del HPV (36% en los casos HPV-positivos frente al 22%en los HPV-negativos), estas diferencias no fueron estadísticamente significativas (P=0,32). Conclusiones: La presencia del HPV en las células tumorales no parece relacionarse con una incidencia significativamente mayor de amplificación del gen CCND1 en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello (AU)

Introduction: infection by oncogenic subtypes of human papilloma virus (HPV) and cyclin D1 gene (CCND1) amplification are frequent events in head and neck squamous cell carcinomas. The objective of this paper is to establish the relationship between the presence of human papilloma virus (HPV) gene sequences and the development of CCND1 gene amplification in these tumours. Materials and methods: 59 squamous cell carcinomas of the head and neck were studied for HPV types 6b and 16 and CCND1 gene amplification by polymerase chain reaction. Results: HPVDNA was detected in 14 tumors (24%). Ten of them were positive for the HPV type 6b and 4 for the HPV type 16.CCND1 gene amplification was found in 15 cases (25%). Although we have found a higher frequency of CCND1 amplification in the HPV-positive cases (36%, versus 22% in the HPV-negative cases), these differences were not statisticallysignificant (P= 0,32). Conclusions: The presence of HPV gene sequences does not seem to be related to a significative higher incidence of CCND1 gene amplification in the squamous cell carcinomas of the head and neck (AU)

Extracción de ADN con resina chelex en el análisis de la amplificación oncogénica en carcinomas de cabeza y cuello / DNA extraction using chelex resin for the oncogenic amplification analysis in nead and neck tumours

La extracción de ADN de tejido tumoral puede ser el proceso más laborioso y complejo en la amplificación de ADN mediante PCR cuando se utiliza el procedimiento con fenol-cloroformo. Comparamos este método de extracción extenso, lento y caro con otras dos técnicas basadas en el uso de resina Chelex-100. Esta resina quelante ha sido utilizada para la extracción de ADN de diferentes tejidos para su uso con la PCR. Estos procedimientos son simples, rápidos y no requieren múltiples pasos. En este trabajo comparamos la extracción de ADN procedente de 30 carcinomas epidermoides de cabeza y cuello utilizando la precipitación con solventes orgánicos, resina Chelex-100 con y sin procesamiento previo con proteinasa K. Los resultados evidencian que el procedimiento con proteinasa K y resina Chelex-100 es un método tan eficaz como la precipitación con fenol-cloroformo (AU)

DNA extraction from tissues can be the most laborious and complex step in amplifying DNA by PCR when phenol-choroform procedure is used. We compare this lengthy, slow and expensive extraction method with other two based in the use of Chelex-100 resin. This chelating resin has been applied for extracting DNA from different tissues to use with the PCR. These procedures are simple, rapid and do not require multiple steps. In this study we compared DNA extraction from 30 head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC) using organic solvent precipitation, Chelex 100 resin with and without proteinase K pretreatment. The results show that proteinase K-Chelex 100 procedure is as efficient as the phenol-chloroform one (AU)

Inactivación de P53 y amplificación de la ciclina D1 en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello / Inactivation of P53 and amplification of cyclin D1 in squamous cell carcinomas of the head and neck

Los genes P53 y CCND1 (ciclina D1) juegan un papel clave en el control del ciclo celular. Las anomalías de dichos genes son frecuentes en diversos tipos de cánceres, incluyendo los de cabeza y cuello. El objetivo de este estudio es investigar sí existe una relación entre la inactivación del gen P53 (determinada como pérdida de heterocigosidad) y la amplificación del gen CCND1 (determinada mediante PCR diferencial) y si dichas anomalías se correlacionan con el pronóstico en una serie de 56 carcinomas epidermoides de cabeza y cuello. Se halló pérdida de heterocigosidad del gen P53 en 39 casos (70 por ciento) y amplificación del gen CCND1 en 17 casos (30 por ciento). Ambas anomalías fueron encontradas conjuntamente en 11 casos (20 por ciento), no habiendo una relación significativa entre ellas (P=0,83).La inactivación de P53 no se asoció con ninguno de los parámetros clínicopatológicos analizados, ni con la evolución de los pacientes. La amplificación del CCND1 se relacionó con estadios T avanzados (P=0,02), con la presencia de metástasis ganglionares (P=0,01) y con una menor supervivencia (P=0,002). La combinación de ambas anomalías genéticas parece tener un patrón aditivo, pues se asoció con una mayor incidencia de recidivas tumorales y con una peor supervivencia que los casos con una sola de las alteraciones. En conclusión, las anomalías de los genes P53 y CCND1 son frecuentes en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello. Cuando se consideran conjuntamente son más informativas que cada una de ellas individualmente y podrían tener valor pronóstico en estos carcinomas. (AU)

P53 and CCND1 (cyclin D1) genes play a critical role in the cell cycle regulation. Abnormalities of these genes are frequent in different types of cancers, including those of the head and neck. The aim of this work is to investigate whether P53 inactivation (determined by loss of heterozygosity analysis) is related to CCND1 gene amplification (determined by differential PCR analysis), and if these alterations are correlated with clinical outcome in a series of 56 patients with squamous cell carcinoma of the head and neck. Loss of heterozygosity of the P53 gene was found in 39 cases (70%) and CCND1 amplification in 17 cases (30%). Both abnormalities together were found in 11 cases (20%), without a significant association between them (P = 0.83). No relationship was found between P53 inactivation, the clinico-pathological parameters analyzed and the clinical outcome. CCND1 amplification was associated with advanced T-stages (P = 0.02), nodal metastases (P = 0.01) and a decreased survival (P = 0.002). The combination of both abnormalities shows a pattern that seems to be additive, since it was associated with an increase in tumor recurrences and a decrease in survival that was higher than for either of them individually. In conclusion, P53 and CCND1 abnormalities are frequent in squamous cell carcinomas of the head and neck. The combined analysis of these abnormalities seems to be more informative than either of them individually and may have a prognostic value in these carcinomas (AU)

Amplificación del oncogén CCND1 y contenido celular de ADN en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello / CCND1 oncogene amplification and cellular DNA content in squamous cell carcinomas of the head and neck

La proteína ciclina D1 (codificada por el gen CCND1) favorece la progresión del ciclo celular en el punto de control G1/S. La sobrexpresión de esta proteína (por ejemplo como consecuencia de la amplificación del gen CCND1) podría favorecer la acumulación de anomalías cromosómicas al impedir el control del daño genético en ese punto. En este estudio analizamos si la amplificación del gen CCND1se asocia a una mayor frecuencia de alteraciones en el contenido celular de ADN. Se estudian 31 carcinomas epidermoides de cabeza y cuello. La amplificación del gen CCND1se determinó mediante la reacción en cadena de la polimerasa. El contenido celular de ADN se analizó mediente citometría de flujo. Se halló amplificación del gen CCND1en 6 casos (19 por ciento). Trece (42 por ciento) casos eran diploides y 18 (58 por ciento) aneuploides. De los 6 casos con amplificación del gen CCND1, 2 (33 por ciento) eran aneuploides frente a 16 (64 por ciento) de los casos sin amplificación del CCND1 (P=0,36). En conclusión, la amplificación del gen CCND1no parece asociarse a una mayor frecuencia de anomalías cromosómicas en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello (AU)

Cyclin D1 protein (encoded by the CCND1 gene) contributes to the progression of the cell cycle in the G1/S checkpoint. Cyclin D1 overexpression (for instance as a consequence of CCND1 amplification) might result in loss of control over genetic damage at this point and in an accumulation of chromosomal aberrations. In this work we analyze whether CCND1 amplification is associated with a higher incidence of alterations in cellular DNA content. 31 squamous cell carcinomas of the head and neck were studied. CCND1 amplification was determined by polymerase chain reaction. Cellular DNA content was determined by flow cytometry. CCND1 amplification was found in 6 (19%) cases. Thirteen (42%) cases were diploid and 18 (58%) were aneuploid. Two (33%) of the 6 cases with CCND1 amplification were aneuploid compared with 16 (64%) of the cases without CCND1 amplification (P = 0.36). We conclude that CCND1 amplification is not associated to a higher incidence of chromosomal aberrations in squamous cell carcinomas of the head and neck (AU)

Alteraciones moleculares en los carcinomas epidermoides de la orofaringe / Molecular alterations in oropharyngeal squamous cell carninomas

En la mayoría de los estudios sobre alteraciones moleculares en los carcinomas epidermoides de cabeza y cuello no se realiza distinción entre las diferentes localizaciones de esta área. El objetivo de este estudio es describir las alteraciones moleculares propias de los carcinomas epidermoides de la orofaringe. Se estudian 29 carcinomas de orofaringe con un seguimiento mínimo de 36 meses.Las alteraciones moleculares analizadas fueron: la amplificación de la región 11q13 (en los 29 casos) y de los oncogenes MYC y ERBB1 (en 22 casos); la integración del virus del papiloma humano (HPV) tipos 6b y 16 (en 22 casos); las pérdidas de heterocigosidad de los genes p53 y NAT2 (en 12 y 13 casos informativos, respectivamente); y el contenido celular de ADN (en 13 casos). Las alteraciones más comunes fueron las pérdidas de heterocigosidad de los genes p53 (67 por ciento de los casos) y NAT2 (54 por ciento), seguidas de la amplificación de 11q13 (49 por ciento). La amplificación del ERBB1 se encontró en el 14 por ciento de los casos, y la del MYC en sólo un caso (5 por ciento). El 23 por ciento de los casos presentaban integración del HPV. De los 13 casos analizados 9 (69 por ciento) eran aneuploides. La única alteración con posible significado pronóstico fue la amplificación de 11q13, con tendencia a asociarse con una mayor frecuencia de metástasis ganglionares y de recidiva tumoral (AU)

In most of the studies about molecular alterations in squamous cell carcinomas of the head and neck there is not distinction between the different subsites of this area. The objective of this study is to describe the molecular alterations in squamous cell carcinomas of the oropharynx. Twenty-nine oropharyngeal carcinomas, with a minimum follow-up of 36 months, were studied. The molecular alterations analyzed were: the amplification of 11q13 region (in the 29 cases), and the MYC and ERBB1 oncogenes (in 22 cases); the integration of Human Papillomavirus (HPV) types 6b and 16 (in 22 cases); the loss of heterozygosity (LOH) of p53 and N-acetyltransferase-2 (NAT2) gene (in 12 and 13 informative cases, respectively); and the cellular DNA content (in 13 cases). The most frequent alterations found were the LOH at p53 (67%), and NAT2 (54%) locus, followed by 11q13 amplification (49%). ERBB1 amplification was found in 14% of the cases, and MYC amplification only in one (5%). Integration of the HPV was found in 23% of the cases. Nine (69%) of the 13 analyzed cases were aneuploid. The only alteration with a prognostic significance was 11q13 amplification that showed a tendency to be associated with a higher frequency of nodal metastases and tumor recurrence (AU)

Repercusión sobre la mucosa nasal y sistémica del uso tópico y prolongado de la Budesonide en pacientes con rinitis alérgica perenne / Repercussion on the nasal and systemic mucosa of the topical and prolonged use of budesonide in perennial allergic rhinitis patients

En un estudio prospectivo, se determinó la concentración plasmática de cortisol a las 9.00 horas y se realizó estudio histopatológico de especímenes biópsicos tomados en el comete inferior a 40 pacientes diagnosticados de rinitis alérgica perenne y que habían sido sometidos a tratamiento tópico con Budesonide durante meses o años. En. un solo paciente se observó elevación del nivel del cortisol plasmático y no cambios significativos fueron observados en el estudio histopatológico. Estos hallazgos sugieren que el uso tópico de Budesonide durante largo tiempo no afecta la morfología de la mucosa nasal ni tiene repercusión sistémica significativa (AU)

In a prospective study, measurement of a 9.00 a.m. basal serum cortisol and biopsies of the inferior turbinate mucosa were taken from 40 patients using topical nasal corticosteroid (Budesonide) continuously for month or years. No systemic adverse effects and no histopathological changes of significance were found. These findings do no suggest that topically corticosteroids are harmful to the nasal mucosa and no produce systemic effects (AU)